賽默飛離子色譜柱是一種通過(guò)檢測液體中陰陽(yáng)離子的常量以及痕量的測量方式,在該過(guò)程中,利用抑制住抑制水質(zhì)中電解質(zhì)的背景導電率的目的,是液相色譜。賽默飛離子色譜的特點(diǎn)主要在于利用了樹(shù)脂材料,而其進(jìn)樣體積較小,對于淋出液能夠進(jìn)行在線(xiàn)自動(dòng)連接的電導檢測。一般采用酸、堿及鹽的水溶液作為流動(dòng)相,要求系統可以耐酸、耐堿,因此通常賽默飛離子色譜裝置采用非金屬材質(zhì)。
一、賽默飛離子色譜柱的選擇
1、樣品是極性的且弱酸性的就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱
2、如果樣品極性太強,或酸性太強;可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱。缺點(diǎn)是離子對試劑平衡時(shí)間長(cháng),對流動(dòng)相pH要求比較精密,否則很難重復實(shí)驗,另外離子對試劑很難洗下來(lái),基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實(shí)驗。
3、若樣品是堿性的可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì),且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過(guò)修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等),他們都會(huì )減少堿性化合物的拖尾,一般會(huì )選擇中性或偏堿的條件下做,因為這樣可增加堿性樣品的保留。
4、如果堿性化合物的極性太強,或堿性太強;可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測,優(yōu)點(diǎn)是方法開(kāi)發(fā)簡(jiǎn)單,缺點(diǎn)是目前實(shí)現這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少,價(jià)格也高?;蛘哌x用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用,這也是很經(jīng)典的檢測堿性樣品的方法)選擇強離子交換柱。缺點(diǎn)是不能用來(lái)分析其它樣品,對流動(dòng)相pH要求比較精密,否則很難重復實(shí)驗。也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱。
二、賽默飛離子色譜柱的清洗
1.對所做的樣品要有充分的了解
用對該樣品洗脫能力zui強的流動(dòng)相清洗
2、硅膠柱的一般方法
先用甲醇法洗去極性雜質(zhì)
用干燥的二氯甲烷、正庚烷100~200ml依次活化
3、鍵合相柱(烷基)的一般方法
20倍柱體積德:甲醇-氯仿-甲醇-水依次沖洗
柱子尺寸柱子體積沖洗體積
150*4.6mm2.5ml50ml
200*4.6mm3.3ml65ml
250*4.6mm4.2ml80ml
三、賽默飛離子色譜柱的存放
1、存放前的處理(除去雜質(zhì)、鹽)
2、合適的存放溶劑
3、避免色譜柱床的干枯
4、避免機械震動(dòng)
5、防止細菌生長(cháng)
6、注意存放的溫度