高效液相色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于70Kg/cm2時(shí),也可采用厚壁玻璃或石英管,管內壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應,不銹鋼柱內壁多經(jīng)過(guò)拋光。也有人在不銹鋼柱內壁涂敷氟塑料以提高內壁的光潔度,其效果與拋光相同還有使用熔融硅或玻璃襯里的,用于細管柱。色譜柱兩端的柱接頭內裝有篩板,是燒結不銹鋼或鈦合金。取決于填料粒度,目的是防止填料漏出,柱內徑一般是根據柱長(cháng)、填料粒徑和折合流速來(lái)確定,目的是為了避免管壁效應。
高效液相色譜柱要如何反沖:
液相色譜柱反沖時(shí)遵循的原則是用比流動(dòng)相洗脫能力更強的溶劑沖洗。
反相色譜柱可以選擇極性較小的溶劑反向沖洗,推薦如下沖洗方法:
水→甲醇→乙腈→異丙醇→二氯甲烷→異丙醇→乙腈
正相色譜柱可以選擇極性較大的溶劑反向沖洗,沖洗方法如下:
正己烷→二氯甲烷→乙酸乙酯→異丙醇→乙腈→甲醇
如果流動(dòng)相中含有緩沖鹽,在運行序列過(guò)程中出現柱壓異常升高的現象,則發(fā)生了緩沖鹽在色譜柱柱床上析出,推薦采用如下維護方法:
1、用甲醇/水反向沖洗色譜柱60個(gè)柱體積;
2、用甲醇/水反向沖洗色譜柱過(guò)夜。