HyPURITY色譜柱的使用壽命和以下因素有關(guān)
更新時(shí)間:2018-11-08 點(diǎn)擊次數:1741
HyPURITY色譜柱的使用壽命,除了與所分析的樣品和流動(dòng)相及使用頻率有關(guān)系外,主要的是與日常的維護密切相關(guān)。HyPURITY色譜柱的使用壽命主要是柱效和柱壓兩個(gè)指標來(lái)衡量,如果一支HyPURITY色譜柱柱效太低或柱壓太高,通常被認為該HyPURITY色譜柱已經(jīng)結束。因此,延長(cháng)HyPURITY色譜柱使用壽命的關(guān)鍵是,消除引起柱效下降和柱壓升高的因素。以下是HyPURITY色譜柱的日常維護方法:
一、流動(dòng)相的PH應在使用的范圍內
流動(dòng)相超過(guò)其PH范圍將會(huì )導致硅膠基質(zhì)流失和鍵合相碳鏈斷裂,使柱效下降,使用壽命變短。由于流動(dòng)相的PH控制不當而對HyPURITY色譜柱造成的損害,通常很難是HyPURITY色譜柱恢復,因此必須認真對待,嚴格控制流動(dòng)相的PH值。
二、去除樣品和流動(dòng)相中的固體顆粒
樣品和流動(dòng)相中含有的固體顆粒物質(zhì)會(huì )堵塞HyPURITY色譜柱篩板,篩板被堵住不僅會(huì )引起柱壓的升高,而且也會(huì )引起柱效下降,因為篩板的堵塞會(huì )引起液流不均,導致色譜峰型拖尾、變寬,從而使柱效下降。因此,建議使用超純水和色譜純試劑,在分析樣品前對樣品進(jìn)行針筒過(guò)濾,流動(dòng)相過(guò)0.45μm濾膜。
三、使用保護柱或在線(xiàn)過(guò)濾器
樣品和流動(dòng)相經(jīng)過(guò)濾后并不能*消除固體顆粒物質(zhì),因為泵的磨損、密封圈和管路的老化也會(huì )產(chǎn)生固體顆粒物質(zhì),這些固體顆粒被流動(dòng)相帶入HyPURITY色譜柱,堵塞篩板,導致柱壓升高、柱效下降。保護柱和在線(xiàn)過(guò)濾器上都有篩板,其孔徑與HyPURITY色譜柱孔徑相同,因此可以阻止固體顆粒物質(zhì)到達HyPURITY色譜柱,有效防止HyPURITY色譜柱篩板的堵塞。由于柱壓升高在分析故障中占很大比例,因此,除對樣品和流動(dòng)相進(jìn)行過(guò)濾外,建議您在HyPURITY色譜柱進(jìn)樣端加上保護柱或在線(xiàn)過(guò)濾器。
如果HyPURITY色譜柱柱壓升高是由于進(jìn)樣端篩板被堵引起的,可選擇以下方式進(jìn)行補救:
1.先在HyPURITY色譜柱前加上保護柱或在線(xiàn)過(guò)濾器,然后用甲醇、水=20/80ml/min反向沖HyPURITY色譜柱180min.
2.先在HyPURITY色譜柱進(jìn)樣端加上保護柱或在線(xiàn)過(guò)濾器,然后反向使用。
四、正確使用緩沖鹽
緩沖鹽通常易溶于水,難溶于有機溶劑,因此緩沖鹽使用不當會(huì )使其析出,堵塞填料基質(zhì)上的微孔和顆粒間的空隙,使填料板結,柱壓上升;同時(shí)阻礙了基質(zhì)上鍵合的碳鏈自由舒展,使HyPURITY色譜柱的保留能力下降,柱效降低。緩沖鹽析出后,去除非常困難,因此,正確的使用緩沖鹽對延長(cháng)HyPURITY色譜柱使用壽命非常重要。
正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出,因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結為一句話(huà):使用前要過(guò)濾,使用后要沖洗。
五、防止強保留物質(zhì)在HyPURITY色譜柱上存留
強保留物質(zhì)和大分子化合物在HyPURITY色譜柱中累積,對樣品中的化合物產(chǎn)生額外的保留行為,不僅引起峰型變寬、拖尾,使柱效下降,同時(shí)也會(huì )引起保留時(shí)間的變化,累積到一定程度時(shí)還會(huì )導致柱壓升高。由于強保留物質(zhì)和大分子化合物對色譜分離的影響是一個(gè)累積效應,需要一定的時(shí)間才會(huì )體現出來(lái),但對許多藥品特別是復雜樣品而言,很難判斷其是否是含有強保留物質(zhì),因此要防止強保留物質(zhì)的累積,需要在每天的日常維護中用純甲醇或乙氰清洗HyPURITY色譜柱。